膽堿是三甲基胺的氫氧化物， 首次由Streker從豬膽汁 中提取出來，現(xiàn)已成為人類常用的食品添加劑，歐盟 1991 年將膽堿列為允許添加于嬰兒食品中的產(chǎn)品。膽堿屬于B 族維生素，是合成細胞膜磷脂的必須物質(zhì)，對保持細胞結(jié) 構(gòu)完整和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)都有十分重要的作用，對神經(jīng)遞質(zhì)乙酰 膽堿的合成以及肝中脂質(zhì)轉(zhuǎn)運也極為重要，又是甲硫氨酸 循環(huán)中合成S-腺苷甲硫氨酸的甲基供體 [1-2] ，同時也是 α7 煙堿乙酰膽堿受體選擇性激動劑 [3]。

1 膽堿對神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育的遺傳學效應(yīng)

有研究證實，膽堿在產(chǎn)前或出生后早期有高效的神 經(jīng)營養(yǎng)作用 [4] 。作為甲基供體，膽堿調(diào)控組蛋白甲基化和 DNA 甲基化，這兩種調(diào)控基因表達的遺傳機制很可能與神 經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育和功能有關(guān) [5] 。膽堿通過調(diào)節(jié)神經(jīng)元和內(nèi)皮 祖細胞基因表達的表觀遺傳效應(yīng)來改善腦功能。嚙齒類動 物在圍生期可能通過這些表觀調(diào)控機制影響胎兒海馬血管 和神經(jīng)發(fā)生、神經(jīng)突增生以及可塑性基因表達，并最終導(dǎo) 致記憶功能的永久性變化 [6] 。發(fā)育時期慢性甲基供體缺乏 會影響海馬依賴性學習記憶和基因表達，諸如蛋氨酸、膽堿、葉酸與一碳代謝相關(guān)的營養(yǎng)物已經(jīng)被證實對DNA 的甲 基化具有重要作用，而 DNA 甲基化是控制基因表達的一個 重要因素，它們的缺乏會導(dǎo)致整個腦區(qū)高甲基化，另外多 種多樣的DNA 甲基化變化形式與神經(jīng)生物學、行為學以及 認知功能紊亂密切相關(guān)。Tomizawa等 [7] 證實了膽堿與基因組甲基化的關(guān)系，發(fā) 現(xiàn)甲基供體缺乏會使小鼠的新物體識別能力受損且恐懼感 消失；也發(fā)現(xiàn)甲基供體缺乏組小鼠的海馬Gria1基因表達降 低且Gria1啟動子區(qū)特異性cpG 島高甲基化。Ishii等 [8] 發(fā) 現(xiàn)生長發(fā)育時期甲基供體缺乏會影響成年小鼠的恐懼和焦 慮情緒。 另外Blusztajn和Mellott[9] 發(fā)現(xiàn)膽堿能夠影響2個 主要調(diào)控基因表達的表觀遺傳效應(yīng)—DNA 甲基化和組蛋 白甲基化，提出嚙齒類動物孕期高膽堿攝入能夠提高成年 期認知功能和抵抗年齡性的認知退化，這些行為學變化伴 隨著電生理、神經(jīng)解剖、神經(jīng)化學的變化和多種皮質(zhì)、海 馬基因表達形式的變化，這些變化的基因包括了編碼與 學習記憶生化機制相關(guān)的重要基因；而且，孕期攝入膽堿 可調(diào)控DNA(Dnmt1，Dnmt3a)和組蛋 白 (G9a/Ehmt2/Kmt1c， Suv39h1/Kmt1a) 甲基轉(zhuǎn)移酶的表達，停止攝入膽堿數(shù)月后 這些作用仍然存在，且與胎兒肝和大腦皮質(zhì)誘發(fā)的全基因 和特異性基因胞嘧啶甲基化相關(guān)，并與組蛋白 H3賴氨酸殘 基4、9、27 的變化相關(guān)。也有相關(guān)研究顯示，正常老年人 群非文字記憶和視覺記憶與膽堿攝入量呈正相關(guān)，但目前 還不清楚膽堿對這類人群認知功能的影響是通過調(diào)控表觀 遺傳、合成乙酰膽堿還是合成磷脂。

2  圍生期攝入膽堿對出生后腦功能的影響

膽堿對大腦發(fā)育關(guān)鍵時期 ( 圍生期) 的作用非常重要， 它可以影響近期至遠期的記憶功能。Langley等 [10] 發(fā)現(xiàn)早期 發(fā)育階段高膽堿攝入能夠改善自閉癥小鼠的社交行為缺陷 和焦慮；補充膽堿明顯減少小鼠挖掘行為，提高高架迷宮開 放臂的進入率和降低開放臂中花費的時間。Gleen等 [4] 對胚 胎 10 ~ 22 d 的孕期大鼠和其幼鼠 ( 出生后25 ~ 50 d)補充膽 堿，而成年時期未補充膽堿，其后代在開場試驗中較少出 現(xiàn)焦慮，在強迫游泳測試中移動較頻繁，表明發(fā)育時期補 充膽堿能夠使個體抵抗抑郁等心理學障礙。Kelley等 [11] 發(fā)現(xiàn)圍生期未補充膽堿的唐氏綜合征模型 Ts65Dn 小鼠和2N 小鼠腦部的膽堿基轉(zhuǎn)移酶密度與空間記 憶能力呈負相關(guān)，補充膽堿的 2N 小鼠其腦部轉(zhuǎn)移酶密度與 記憶能力呈正相關(guān)，提示圍生期補充膽堿能增強神經(jīng)支配 并改善海馬功能，使其有可能成為未來人類唐氏綜合癥的 治療策略。Ash等 [12] 增加圍生期唐氏綜合征模型大鼠膽堿 攝入，其后代老年時期空間識別能力增強、基底部前腦膽 堿能神經(jīng)元數(shù)量與大小均明顯提高。因此圍生期攝入膽堿 對于攜帶唐氏綜合征胚胎的孕婦也許是一種安全有效的治 療方式，并在很大程度上對老齡化人群基底前腦膽堿能神 經(jīng)元起到保護作用。

癲癇是一種突然發(fā)生、反復(fù)發(fā)作的神經(jīng)系統(tǒng)綜合征 [13]， 可引起海馬神經(jīng)元病理性改變并導(dǎo)致嚙齒類動物空間學習 和記憶缺陷。大量動物研究表明，圍生期補充膽堿對諸如 胎兒乙醇攝入、癲癇和衰老所致神經(jīng)損傷均有保護作用。 Wong-Goodrich等 [14] 報道孕期大鼠在胚胎 12 ~ 17 d 時補充 膽堿能夠緩解其后代癲癇所致的海馬神經(jīng)元退變、齒狀回 增生及GFAP mRNA表達水平，可抵抗谷氨酸脫羧酶表達 缺失并提高癲癇發(fā)作前BDNF、NGF、IGF-1水平，表明產(chǎn) 前補充膽堿能夠?qū)ζ浜蟠ｑR起到保護作用并抑制癲癇所 致的神經(jīng)病理學改變以及認知功能損傷。該作者還發(fā)現(xiàn)胚 胎 12 ~ 17 d補充膽堿能夠逆轉(zhuǎn)其后代成年大鼠的遠期空間 記憶缺損。與環(huán)境富集和訓練改善大鼠癲癇導(dǎo)致的認知損 傷相比，單獨產(chǎn)前補充膽堿能夠在更大程度上提供類似的 神經(jīng)保護作用，且水迷宮訓練之后大鼠新生神經(jīng)元門遷移 降低 [15] 。表明預(yù)防性產(chǎn)前補充膽堿對紅藻氨酸誘發(fā)癲癇所 致的遠期認知功能和神經(jīng)元損害具有保護作用，對認知功 能康復(fù)可能有益。該研究同時發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)前缺乏膽堿的大鼠 其后代不易出現(xiàn)紅藻氨酸誘發(fā)的癲癇，與一般飲食對照組 大鼠一樣，存在類似癲癇所致的海馬組織病理學改變、谷 氨酸脫羧酶表達缺失、海馬膠質(zhì)纖維酸性蛋白和生長因子 的激活 [16]。表明產(chǎn)前缺乏膽堿限制海馬可塑性形成的同時， 并沒有加重海馬短暫興奮毒性損傷所致的癲癇以及后續(xù)的 神經(jīng)病理學改變。以上研究結(jié)果表明，產(chǎn)前補充膽堿能夠 抑制癲癇所致的海馬神經(jīng)病理學改變，并能對海馬微環(huán)境 產(chǎn)生近期乃至遠期的保護作用。

鐵缺乏或鐵過量都會導(dǎo)致細胞和器官功能紊亂，血漿 鐵濃度較低時會限制鐵吸收和血紅蛋白合成，從而造成貧血 [17] 。Kennedy 等[18] 對胚胎期缺乏原鐵的懷孕大鼠實施膽堿干預(yù)后，其后代新物體識別能力恢復(fù)、海馬基因表達增 加，而社交行為在產(chǎn)前膽堿補充組中部分改善。表明產(chǎn)前 補充膽堿也許能輔助新生兒缺鐵治療、改善長期認知和社 會情感缺陷并促使海馬可塑性基因表達。

孕期攝入乙醇是精神發(fā)育遲滯主要的原因，乙醇致 畸的機制之一就是L1細胞黏附分子 (L1)功能的紊亂。Tang 等 [19] 動物細胞實驗表明，出生后 6 d大鼠的顆粒神經(jīng)元經(jīng) 膽堿預(yù)處理能夠顯著降低乙醇對L1信號、脂質(zhì)筏中 L1 的 分布及L1調(diào)控的神經(jīng)突外生的影響，但并不能使 L1功能 完全回到正常。Hunt[20] 動物實驗表明，早期發(fā)育階段補充 膽堿可使大鼠長期的記憶增強，而且出生前后攝入膽堿可 抵抗乙醇產(chǎn)生的不良反應(yīng)。Otero等 [21] 發(fā)現(xiàn)患胎兒乙醇譜系 疾病動物的記憶和行為功能受損，這些缺陷可能與乙醇誘 導(dǎo)的海馬和前額葉皮質(zhì)變化有關(guān)，而膽堿可通過調(diào)控DNA 甲基化來抑制乙醇的致畸作用。Kable[22] 的研究提示， 膽堿 通過阻止胎兒乙醇相關(guān)的二甲基甘氨酸的減少，從而促進 腦功能正向發(fā)育。Monk等 [23] 發(fā)現(xiàn)胎兒期攝入乙醇降低海馬 背部毒蕈堿 (M1)受體的密度， 不能被膽堿逆轉(zhuǎn)； 而發(fā)育期乙 醇攝入增加M(2/4)受體的密度，可被膽堿逆轉(zhuǎn)。表明圍生 期補充膽堿能夠通過影響膽堿能系統(tǒng)緩解乙醇相關(guān)的病理 改變。Boeke等 [24] 在895名母親中評估了孕早期攝入膽堿、 維生素B12、甜菜堿和葉酸對后代 7歲時視覺記憶和智力水 平的影響，結(jié)果表明除膽堿外攝入其他營養(yǎng)物和認知測試 不相關(guān)，孕期攝入合適劑量的膽堿對孩子 7歲時視覺記憶 的提高有明顯幫助。另外一項臨床研究表明，孕婦日常飲 食服用磷脂酰膽堿 (含適量的膽堿)并不能增強娩出后嬰兒 的大腦發(fā)育、身體發(fā)育、語言發(fā)育、短期視覺記憶和長期 情景記憶 [25] 。這也許需要更長的后期隨訪來揭示可能出現(xiàn) 的效應(yīng)。

3 膽堿對成年個體認知功能的影響

膽堿作為質(zhì)膜雙層細胞外葉最常見的極性基團，其攝 取是膜磷脂合成的限速步驟，對缺血壞死神經(jīng)元膜損傷的 及時修復(fù)和細胞存活極為重要。有研究發(fā)現(xiàn)，大鼠外傷性 腦損傷后，缺血再灌注引起脂質(zhì)過氧化并啟動多種細胞凋 亡途徑，使海馬和皮質(zhì)神經(jīng)元 α7煙堿膽堿能受體表達降 低并最終產(chǎn)生認知障礙，而選擇性 α7煙堿乙酰膽堿受體 激動劑膽堿對外傷性腦損傷大鼠的神經(jīng)功能有改善作用。 Borges等 [26] 發(fā)現(xiàn)短期口服膽堿可提高全腦缺血大鼠海馬 CA1神經(jīng)元的存活時間。Guseva等 [27] 對全腦缺血性損傷小 鼠進行膽堿預(yù)處理和后處理發(fā)現(xiàn)在水迷宮測試中空間記憶 有一定的提高，并可降低腦部炎癥，使外傷性腦損傷誘導(dǎo) 的煙堿乙酰膽堿受體表達缺陷回到正軌。Jin等 [28] 也發(fā)現(xiàn)膽 堿可以通過上調(diào) α7nAchR表達使低氧誘導(dǎo)因子 α 和血管 內(nèi)皮生長因子產(chǎn)生加快，從而促進全腦缺血大鼠的腦血管 和大腦皮質(zhì)毛細血管再生，表明 α7nAchR激動劑可促進腦 損傷神經(jīng)功能恢復(fù)。但也有報道指出膽堿改善全腦缺血的 認知功能效果不明顯。Guseva等 [29] 報道兩組大鼠創(chuàng)傷性腦 損傷前后，增加膽堿攝入組與普通飲食組相比認知功能紊亂均有出現(xiàn)，差異不顯著。

膽堿亦可靶向增強膽堿能系統(tǒng)來調(diào)節(jié)記憶。Blake等在海馬背側(cè)給予 α7煙堿受體激動劑膽堿可恢復(fù)東莨菪堿誘導(dǎo)的記憶障礙。McCall等 [31] 比較了大鼠從斷乳至成年早期單獨喂養(yǎng)膽堿、ω-3脂肪酸、植物雌激素這些神經(jīng)營養(yǎng)物質(zhì)對情緒和海馬可塑性的影響，結(jié)果表明補充膽堿能夠影響情緒功能，在開放場地暴露于捕食者時焦慮次數(shù)少，在強迫游泳后較少發(fā)生行為相關(guān)的失望，脂肪酸組和植物雌激素組效果都不及膽堿； 組織學檢查和行為學測試結(jié)果一致，膽堿組能顯著增加海馬新生神經(jīng)元，而植物雌激素不增加；另外膽堿和 ω-3脂肪酸在影響細胞膜合成方面有類似的生物學功能。

4 結(jié)語

膽堿作為神經(jīng)營養(yǎng)類物質(zhì)和甲基供體之一，在圍生期增加攝入也許能促進胎兒神經(jīng)發(fā)育，也可通過多種機制和途徑改善相應(yīng)腦功能缺陷,這些機制可能包括神經(jīng)元和內(nèi)皮祖細胞基因表達的表觀調(diào)控、激活 α7nAchR、增強膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)、保護細胞膜磷脂作用、抵抗氧化應(yīng)激等